Recomendaciones

Para realizar un buen frotis sanguíneo

• Realizarlo del tubo de muestra con EDTA, antes de las 2 horas desde la extracción
• Mezclar la muestra con al menos 8 inversiones completas
• Realizar el frotis en mesón, empleando láminas portaobjetos pulidas y frotador pulido.
• Conocer Hb y #GB para ajustar cantidad de sangre y ángulo del frotador
• Dejar una separación de 1cm de unos de los bordes. Colocar una gota de sangre de entre 1 a 3 mm con capilar o dispensador
• Con la mano más hábil, colocar el frotador antes de la gota de sangre con un ángulo de entre 25° a 45°
• Realizar un movimiento firme y continuo del frotador (sin mirar, ni dibujar)
• Limpiar el frotador
• Dejar secar al menos 5 minutos
• Fijar con metanol lo antes posible (antes de la primera hora)
• Emplear una coloración de Romanowsky completa: Wrigth, May-Gruwarld, Leishman o sus combinaciones con Giemsa.
• Corroborar el frotis obtenido con los criterios de calidad

Con relación a los reactivos

• Comprar metanol anhidro, absoluto y sin acetona
• La fijación usual es entre 3 a 5 minutos
• Cada nuevo lote de colorante debe ser filtrado antes de su uso
• El tiempo de coloración varia con cada marca y lote. Ajustar los tiempo de coloración. Los tiempos usuales van entre 3 a 10 minutos para un buen Wrigth.
• Preparar Buffer según la necesidad
• Emplear goteros para el metanol, colorante y buffer
• Ante cualquier indicio de contaminación, descartar el reactivo

Criterios de calidad de un frotis sanguíneo

Macroscópicas

• La cabeza ha de estar cerca de uno de los extremos del portaobjeto y la cola debe estar cercana al otro extremo del portaobjeto, sin llegar hasta él.
• Un área de trabajo suficientemente amplia, mínimo de 2,5 cm de longitud  a 4 cm (¾ partes del portaobjeto).
• Transición gradual en el espesor del frotis, de un área gruesa (inicio) a delgada (cola)
• Coloración gradual del frotis, de intenso (inicio) a más claro (cola)
• Ausencia de estrías, ondas o interrupciones
• Borde cuadrado o recto.
• Ausencia de artefactos por la técnica de elaboración.

Microscópicas

• Las células sanguíneas están distribuidas de manera regular.
• Los espacios entre las células son claros.
• Los eritrocitos son de color rojo naranja
• Los gránulos eosinófilos son de color rojo-naranja
• Los gránulos neutrófilos son de color púrpura.
• Los gránulos basófilos son de color azul oscuro o morado.
• El citoplasma de los linfocitos es azul.
• Los núcleos de los leucocitos son de color azul a morado.
• En la tinción el precipitado del colorante debe estar ausente, en caso de existir este debe ser mínimo y no afectar significativamente la visualización.
• Las células rotas o no identificables deben ser una minoría. En ciertas patologías este fenómeno no puede ser evitado y este criterio podría no aplicar.

Los colores son referenciales.

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